光学顕微鏡のための細胞のコントラスト及び解像度を向上させる薄切片作製及び染色プロトコル

T. Niki, S. Saito, and D. K. Gladish

https://doi.org/10.1080/10520295.2019.1601769

ABSTRACT

We developed a novel sectioning and staining method to make high contrast, high resolution sections of plant tissue for light microscopy. Specimens of teosinte (Zea mays L., ssp. mexicana) root tips were fixed and embedded in Technovit 7100™ plastic resin. Thin sections, 1−2.5 μm, were cut and mounted on glass slides. The sections were either treated with RNase or not, then stained with 0.1% toluidine blue O and observed through ∞/0 objective lenses. For light microscopy, the enzyme staining procedure increased resolution and contrast. High magnification ∞/0 objective lenses produced high quality images for digital photography without using a coverslip or immersion oil. Our slide preparation and microscopic analysis were less labor intensive and more rapid than previous methods and enabled rapid and precise alignment of serial transverse sections for both tracking cell lineages and tissue measurements.

根横断面像から根縦断面像構築の試み

仁木 輝緒・斉藤  進・幹   康

第49回根研究集会(2018年10月27日)

テオシント(トウモロコシの祖先種と考えられているイネ科の一年生飼料作物)の発芽種子根に対して,1µm厚の連続横断切片を切り出し,これらの顕微画像から3Dモデルを構築する手法を検討した.このモデルによって,任意切断面での縦断面像を表示させることが可能となった.また,特定の細胞群に着色を施すことにより,任意の視点からの3次元像を表示させることを可能にした.

図1 2本の木部と内鞘を示す縦断面図

図2 2本の木部を中心とする3D画像